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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞復(fù)蘇/凍存小鼠輸卵管上皮細(xì)胞
小鼠輸卵管上皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠輸卵管上皮細(xì)胞輸卵管是卵子運(yùn)輸、儲(chǔ)存、獲能,以及卵母細(xì)胞采取、運(yùn)送、成熟、受精和早期胚胎發(fā)育的重要場(chǎng)所。輸卵管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)可以用于飼養(yǎng)層細(xì)胞,與胚胎共培養(yǎng),克服胚胎的發(fā)育阻滯現(xiàn)象。因此,體外培養(yǎng)輸卵管上皮細(xì)胞,不但可以進(jìn)一步了解影響生殖微環(huán)境變化的因素,而且還可以建立輸卵管上皮細(xì)胞與胚胎共培養(yǎng)體系,研究輸卵管上皮細(xì)胞對(duì)胚胎體外發(fā)育的影響。

產(chǎn)品型號(hào):復(fù)蘇/凍存
更新時(shí)間:2025-06-30
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:404
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小鼠輸卵管上皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :小鼠輸卵管上皮細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB0938h

組織來(lái)源 :輸卵管組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡(jiǎn)介:

輸卵管上皮細(xì)胞分離自輸卵管組織。輸卵管位于子宮底兩側(cè),包裹在子宮闊韌帶上緣內(nèi)。自子宮兩角分別伸展至左、右卵巢,是輸送卵細(xì)胞進(jìn)入子宮的管道,也是卵受精的場(chǎng)所。輸卵管主要分漏斗部、壺腹部、峽部和子宮部,管壁均由粘膜、肌層和漿膜三層組成。粘膜形成許多縱行而分支的皺襞,壺腹部的皺襞Z發(fā)達(dá),高而多分支,故管腔不規(guī)則。至子宮部的皺襞漸減少。粘膜上皮為單層柱狀。由纖毛細(xì)胞和分泌細(xì)胞組成。

纖毛細(xì)胞以漏斗部和壺腹部最多,至峽部和子宮部逐漸減少,纖毛向子宮方向擺動(dòng),使卵移向子宮并阻止病菌進(jìn)入腹膜腔. 分泌細(xì)胞表面有微絨毛,頂部胞質(zhì)內(nèi)有分泌顆粒,其分泌物構(gòu)成輸卵管液。輸卵管上皮細(xì)胞在卵巢雌激素和孕激素的作用下,隨月經(jīng)周期而有變化。雌激素促進(jìn)輸卵管上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)的功能活動(dòng),在子宮內(nèi)膜增生晚期(排卵前) 。纖毛細(xì)胞變成高柱狀,纖毛增多,分泌細(xì)胞頂部充滿分泌顆粒,功能旺盛。至分泌晚期,兩種細(xì)胞均變矮,分泌細(xì)胞的分泌顆粒排空,纖毛細(xì)胞的纖毛也減少。


細(xì)胞特性
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常輸卵管組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。


質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :上皮細(xì)胞樣
傳代特性 :可傳1-2代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%


該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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