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當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞復(fù)蘇/凍存大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自下腔靜脈組織;下腔靜脈是體內(nèi)最大的靜脈,收集下肢、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左、右髂總靜脈匯合而成,匯合部位多在第5腰椎水平,少數(shù)平第4腰椎。下腔靜脈位于脊柱的右前方,沿腹主動脈的右側(cè)上行,經(jīng)肝的腔靜脈溝、穿膈的腔靜脈孔,開口于右心房。

產(chǎn)品型號:復(fù)蘇/凍存
更新時間:2024-07-10
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪問量:426
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大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1233h

組織來源 :下腔靜脈組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡介:

下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自下腔靜脈組織;下腔靜脈是體內(nèi)最大的靜脈,收集下肢、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左、右髂總靜脈匯合而成,匯合部位多在第5腰椎水平,少數(shù)平第4腰椎。下腔靜脈位于脊柱的右前方,沿腹主動脈的右側(cè)上行,經(jīng)肝的腔靜脈溝、穿膈的腔靜脈孔,開口于右心房。

下腔靜脈的前面有肝、胰頭、十二指腸水平部、右睪丸動脈及小腸系膜根越過。后面為有膈腳、第1~4腰椎、有腰交感干和腹主動脈的壁支。右側(cè)與腰大肌、右腎、右腎上腺相鄰,左側(cè)為腹主動脈。下腔靜脈的屬支有髂總靜脈、右睪丸靜脈、腎靜脈、右腎上腺靜脈、肝靜脈、膈下靜脈和腰靜脈,其中大部分屬支與同名動脈伴行。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 : PLL(0.1m g/ml),明膠(0.1%)
培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細(xì)胞形態(tài) : 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 : 可傳2-3代
傳代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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