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當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞復蘇/凍存大鼠海綿體內皮細胞
大鼠海綿體內皮細胞

產品簡介

大鼠海綿體內皮細胞海綿體內皮細胞是襯覆于陰莖海綿竇腔內表面的一種內皮細胞,是血管海綿竇及陰莖血管最基本的組成成分之一,具有合成血管舒張、收縮因子、組成血管管壁,參與血液與組織液成分交換等各種生理功能,對陰莖的勃起發揮著重要作用。

產品型號:復蘇/凍存
更新時間:2025-07-01
廠商性質:生產廠家
訪問量:356
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大鼠海綿體內皮細胞

產品名稱 :大鼠海綿體內皮細胞

產品貨號 :YLK-XB1163h

組織來源 :海綿體組織

產品規格 :5×105cells/T25細胞培養瓶


細胞簡介:

海綿體內皮細胞分離自海綿體組織。陰莖海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構成的血竇結構,它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中,而海綿體內皮細胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面,僅占海綿體組織的2. 8% 。在消化海綿體組織時,膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系,破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。如果消化時間延長或膠原酶濃度過大,平滑肌細胞和成纖維細胞也將被消化下來,從而影響海綿體內皮細胞的純度。因此,比較篩選合適的膠原酶濃度和消化時間是成功分離海綿體內皮細胞的關鍵。


細胞特性

1) 組織來源于實驗動物的正常陰莖組織。

2) 細胞鑒定:vWF免疫熒光染色為陽性。

3) 經鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式:梭形細胞,不規則細胞,貼壁培養。


量檢測

優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養信息

包被條件 :PLL(0. 1m g/ml) ,明膠(0. 1%)
培 養 基 :含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :內皮細胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶

培養條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態。


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養瓶內。
4) 待細胞貼壁后,培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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