人肺微血管平滑肌細胞

產品簡介
人肺微血管平滑肌細胞肺微血管包含無肌細動脈，毛細血管和毛細血管后靜脈。
在肺動脈高壓的發展過程中涉及多種病理因素，其中肺微血管壁的縮窄和重構是導致肺血管阻力升高的主要原因。在肺微血管重構過程中，平滑肌細胞的異常增殖是導致重構的重要原因之一。

產品型號：復蘇/凍存

更新時間：2024-07-09

廠商性質：生產廠家

訪問量：673

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產品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

科研細胞

細胞系原代細胞

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原代細胞培養的主要注意事項

細胞培養實驗室-無菌技術

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人肺微血管平滑肌細胞

產品名稱：人肺微血管平滑肌細胞

產品貨號：YLK-XB0520h

組織來源：腸組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

細胞簡介：

細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

細胞特性

1）組織來源于術后人的肺組織。

2）細胞鑒定：平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性。

3）經鑒定細胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5）細胞生長方式：長梭形細胞，不規則細胞，貼壁培養。

主要功能

① 細胞表面表達介質(IC A M -1和V CAM -1)參與血管壁炎癥反應。

② 是多數重要動脈疾病的靶細胞。

質量檢測

優利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右。3代以內狀態最佳

傳代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培養條件：氣相：空氣，95% 。C O2，5%

該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。

4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細胞收貨脫落

1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。

3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。

4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。

5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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