人肺大動脈內皮細胞

產品簡介
人肺大動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布。該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
肺大動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。

產品型號：復蘇/凍存

更新時間：2024-07-09

廠商性質：生產廠家

訪問量：534

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人肺大動脈內皮細胞

產品名稱：人肺大動脈內皮細胞

產品貨號：YLK-XB0512h

組織來源：肺動脈組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

細胞簡介：

該細胞是一種多功能細胞，尤其在肺的非呼吸功能方面更具特殊意義。當其受損，肺血管通透性升高導致肺水腫，在成年人呼吸窘迫綜合癥發生機制中具有重要意義。但是處于體內多因素共同作用的復雜環境中，對肺血管內皮細胞的功能和代謝以及病變發生機制很難作深入研究。原代肺動脈內皮細胞的體外培養系統有助于在特定的體外條件下研究肺血管內皮細胞的功能。

細胞特性

1) 組織來源于人的正常肺動脈組織。

2) 細胞鑒定：CD31或血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽性。

3) 經鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養。

培養信息

包被條件：PLL(0.1mg/ml)，明膠(0.1%)

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：內皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

傳代比例：1:2

消化液：0.25%胰蛋白/酶

培養條件：氣相：空氣，95%。CO2，5%

該細胞體外培養周期有限。建議使用優利科生物配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。

2. 貼壁細胞消化

1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養。

4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細胞收貨脫落

1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。

3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養瓶內。

4) 待細胞貼壁后，培養觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。

5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養板、共聚焦培養皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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